在ELISA實驗中，抗凝劑用于防止血液樣本凝固。抗凝劑對ELISA（酶聯(lián)免疫吸附測定）的影響主要體現(xiàn)在對樣本處理和檢測結(jié)果的潛在干擾上。不同類型的抗凝劑可能會影響ELISA的準確性，具體影響因素包括：
1、抗凝劑類型對檢測結(jié)果的影響
EDTA-K2抗凝劑：研究表明，使用EDTA-K2抗凝劑對抗-HIV、抗-HCV、HBsAg及抗-TP的檢測結(jié)果產(chǎn)生了較為明顯的干擾。例如，在一項研究中，采用EDTA-K2抗凝劑的樣本中，抗-HIV陽性檢出率為0.15%，抗-HCV陽性檢出率為1.29%，HBsAg陽性檢出率為1.61%，抗-TP陽性檢出率為0.15%1。這表明EDTA-K2抗凝劑可能對這些項目的檢測結(jié)果產(chǎn)生了一定程度的干擾。
2、抗凝劑與試劑盒的兼容性
不同的ELISA試劑盒可能對樣本中的抗凝劑有特定的要求。如果所使用的抗凝劑與試劑盒不兼容，可能會導致檢測結(jié)果的偏差。
3、抗凝劑的選擇
不同的抗凝劑如EDTA、肝素、檸檬酸鈉等，其化學性質(zhì)和作用機制不同。例如，EDTA通過螯合血液中的鈣離子來防止血液凝固，而肝素則通過增強抗凝血酶III的活性來阻止血液凝固。選擇不當?shù)目鼓齽┛赡軙绊憳颖镜姆€(wěn)定性，進而影響ELISA的檢測結(jié)果。
4、肝素鈉抗凝劑對ELISA檢測的影響
酶活性抑制：肝素鈉可直接抑制ELISA系統(tǒng)中辣根過氧化物酶（HRP）的活性，導致顯色信號減弱，尤其在以HRP為標記物的檢測中易出現(xiàn)假陰性。
樣本適用性：在血液免疫四項（HBsAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP）檢測中，肝素鈉抗凝標本的反應(yīng)性檢出率顯著低于EDTA-K?，但需注意其對酶促反應(yīng)的普遍抑制作用。
5、抗凝劑對樣本處理的影響
樣本保存與處理：采供血機構(gòu)應(yīng)避免對含CPD保養(yǎng)液的標本進行ELISA法檢測，以提高TP檢出率，確保輸血安全。此外，為了防止陽性標本的漏檢，建議血袋生產(chǎn)廠家延長針頭與血袋連接處的血液管道的長度，使其不僅能滿足檢測留樣的要求，還能滿足保存留樣的要求。
綜上所述，抗凝劑的選擇對ELISA實驗的結(jié)果有著顯著的影響。為了確保ELISA檢測結(jié)果的準確性，選擇合適的抗凝劑并遵循正確的樣本處理步驟至關(guān)重要。
