酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA）指將可溶性的抗原或抗體結(jié)合到聚苯乙烯等固相載體上，利用抗原抗體結(jié)合專一性進(jìn)行免疫反應(yīng)的定性和定量檢測方法。它是應(yīng)用最多的一種免疫酶技術(shù)。
測任何目標(biāo)蛋白的抗體不止一種，同一家抗體公司可能有好幾種，甚至幾十種。在不同的抗體公司，則更多。那么在眼花繚亂的抗體陣中，如何選擇自己實(shí)驗(yàn)需要的抗體呢?選擇適合實(shí)驗(yàn)的抗體需要綜合考慮多個因素，包括實(shí)驗(yàn)類型、樣本種屬、抗體的特異性、宿主物種來源以及是否需要熒光標(biāo)記等。
ELISA試劑盒中HRP底物范圍較廣，HRP即辣根過氧化物酶（Horseradish Peroxidase）比活性高，穩(wěn)定，分子量小，純酶容易制備，所以最常用。過氧化物酶作為多個試劑盒顯色體系的關(guān)鍵成分，對試劑盒的質(zhì)量有重要影響。辣根過氧化物酶（Horseradish Peroxidase, HRP）的顯色原理基于其酶催化作用（氧化作用）。HRP酶標(biāo)二抗，即辣根過氧化物酶標(biāo)記的二抗，是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)常規(guī)用的二抗。其特點(diǎn)包括比活性高、穩(wěn)定性好、分子量小、純酶容易制備等，因此在免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)中廣泛應(yīng)用。HRP底物主要包括二氨基聯(lián)苯胺(DAB)、氯萘酚和氨乙基咔唑等。
免疫熒光（IF）是一種用于檢測以及識別細(xì)胞和組織中蛋白質(zhì)和其他分子的亞細(xì)胞分布和遷移的強(qiáng)大檢測技術(shù)。IF可用作免疫組織化學(xué) (IHC) 或免疫細(xì)胞化學(xué) (ICC) 中使用的傳統(tǒng)顯色標(biāo)記的替代物。通過使用多種標(biāo)記物的二級抗體，可以研究感興趣蛋白的共定位，這是不能通過常規(guī)IHC或ICC實(shí)現(xiàn)。這是同時分析許多目標(biāo)蛋白時的一個優(yōu)勢，可同時生成大量亞細(xì)胞定位的準(zhǔn)確數(shù)據(jù)。免疫熒光染色是一種常用的細(xì)胞和組織學(xué)研究技術(shù)，它利用特異性抗體與標(biāo)記熒光染料結(jié)合，來檢測和定位細(xì)胞中的特定蛋白質(zhì)或其他分子。
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